ELISA試劑盒嚴謹的操作過(guò)程，得出準確的測試結果
點(diǎn)擊次數：644 更新時(shí)間：2019-03-04
ELISA試劑盒嚴謹的操作過(guò)程，得出準確的測試結果
ELISA試劑盒的基礎是抗原或者抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。同時(shí)結合在固相載體表面的抗原或抗體任然能夠保證其免疫學(xué)活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過(guò)反應而結合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，根據呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。同時(shí)因為酶的催化頻率很高，所以極大的放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。
ELISA試劑盒的測試模式比較常見(jiàn)的有雙抗體夾心法，具體的測定方法如下：
1、首先用雙抗體之一在2-8℃的碳酸鹽緩沖液中過(guò)夜浸泡，形成固相抗體，洗滌去除沒(méi)有和固相結合或者結合的不牢固的抗體之后，用小牛血清或者牛血清白蛋白等封閉，洗滌去除未結合的部分和雜質(zhì)。
2、加入需要測定的臨床樣本，溫育一定時(shí)間。等待需要測定的抗原就會(huì )和固相上特異抗體結合而吸附在固相上。
3、加入酶標記的雙抗體之二，溫育一定時(shí)間。在固相上會(huì )形成雙抗體與特異抗原的夾心產(chǎn)物。
4、加入酶底物，溫育顯色測定。
ELISA試劑盒的這一方法我們有兩步溫育的步驟，我們平常稱(chēng)之為“兩步法”，現在為了簡(jiǎn)化操作步驟，很多推出了“一步法”試劑盒，也就是將上述的2和3合并為了一步，但是雖然一步法相比兩步法操作簡(jiǎn)單，但是也有他的缺陷，容易造成勾狀效應，出現假陰性或定量偏低的結果。
