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上海撫生ELISA流程的說(shuō)明
上海撫生物科技有限公司是一家專(zhuān)注于生物的技術(shù)企業(yè)，主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規生化試劑的、銷(xiāo)售。并代理銷(xiāo)售，致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù)，滿(mǎn)足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細胞生物學(xué)、免疫學(xué) ELISA試劑盒等生物科技實(shí)驗需求。目前很多客戶(hù)因為對品牌的信任度問(wèn)題，公司仍然是一個(gè)非常好的選擇上海撫生ELISA試劑盒，是 你不二的選擇。
剩余的試劑盒材料要妥善保存
標準品分裝后按說(shuō)明書(shū)要求的溫度保存，這樣可以避免污染，對要求冷凍保存的標準品還可以避免反復凍融；酶標板放回錫箔紙袋，加入干燥劑，封緊封口，4℃保存。忌未將酶標板*平衡至室溫，就放回錫箔紙袋，因為此時(shí)由于溫度差，酶標板上會(huì )有水汽，不利于穩定保存。
加樣要快速準確，避免氣泡
加樣時(shí)間宜控制在 15 分鐘內。加樣前要將樣本混勻，特別是凍存后融化的樣本（自然融化的血清等樣本會(huì )有分層現象），應上下顛倒充分混勻，注意動(dòng)作輕緩，避免產(chǎn)生氣泡。如凍存融化后的樣本有沉淀，可以再次離心。整個(gè)加樣過(guò)程都要注意避免產(chǎn)生氣泡。氣泡會(huì )影響蛋白的相互結合，而影響反應進(jìn)行。
孵育時(shí)要保證溫度均勻，防止揮發(fā)變干
孵育時(shí)壓緊封口膜。多塊板一起實(shí)驗時(shí)，要平放各板，不要疊放，以免因溫度不均造成漂移或邊緣效應。
洗板機的應用
使用洗板機，不但可以降低勞動(dòng)強度，而且有利于保證 ELISA 測試的穩定性。目前的全自動(dòng)洗板機不但具有很多實(shí)用的洗滌動(dòng)作，如底部沖洗，兩點(diǎn)吸液，震動(dòng)，交叉吸液；還可以根據需要調節沖洗壓力，沖洗距離，沖洗時(shí)間等參數。通過(guò)優(yōu)選這些動(dòng)作和參數，能保證良好的洗滌效果。洗板機的性能對于結果準確性影響也很大，好的洗板機要保證洗板后的殘留液盡可能的少，一般不超過(guò) 2μL，以洗滌后用人工拍板墊紙不濕為準。應定期檢查抽吸針頭是否堵塞。洗液如果含有吐溫，應隨用隨配。
手動(dòng)洗板的操作指南
加洗液要快速，沒(méi)有多道移液器可以使用洗瓶。洗液應新鮮配制，以免被其他試劑污染，或染菌。加好洗液后浸泡 30s-1min。甩板倒液要迅速干脆。倒液后在吸水紙上拍板，選用無(wú)粉塵和碎屑的吸水紙。需要用力拍板，使孔內沒(méi)有可見(jiàn)液體掛壁；但也不能太重，不能讓樣品干太久。酶標板拍干后立即做后續的加液。
顯色反應的關(guān)鍵點(diǎn)
ELISA 實(shí)驗是個(gè)酶促底物顯色反應，隨時(shí)間增加，顯色變深，所以選擇*佳時(shí)間終止反應是得到準確的標準的曲線(xiàn)和樣本濃度的重要因素。終止過(guò)程要*。使用的 TMB 底物時(shí)*終止點(diǎn)是黃色，不會(huì )有任何程度的藍色或綠色，終止過(guò)程中必要時(shí)可以震蕩 96 孔板，或用槍頭抽吸混勻（終止液含強酸，避免腐蝕）。
數據分析
按照說(shuō)明書(shū)推薦的數據分析方法做曲線(xiàn)擬合及分析。說(shuō)明書(shū)中的標準曲線(xiàn)是在的實(shí)驗室中，由非常有經(jīng)驗的操作人員得到的結果?？蛻?hù)的標準曲線(xiàn)和說(shuō)明書(shū)中的標準曲線(xiàn)可能存在不同，但不等于不好。通常判斷標準曲線(xiàn)合格的標準為：：背景OD 值 <0.2；點(diǎn) OD 值>1.0；相關(guān)系數 R2 接近或等于 1。只要滿(mǎn)足這些條件的標準曲線(xiàn)都是可以使用的。
