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大鼠Janus激酶2elisa檢測試劑盒操作說(shuō)明
我一時(shí)無(wú)語(yǔ)，然而就在這一刻，那份牽掛卻溫柔的洋溢著(zhù)，流過(guò)我那心底，柔軟的角落。踏著(zhù)初冬那被冷落的節奏，數落著(zhù)跌進(jìn)那纏綿里的無(wú)限情思，在無(wú)限的雋永里懷念著(zhù)那綿綿不絕的感傷!初冬的夜，月光悄悄地，輕輕地吻過(guò)我冰冷的臉，于是思緒凌空，聽(tīng)著(zhù)心底那徹然流動(dòng)的往事!接下來(lái)介紹 大鼠Janus激酶2elisa檢測試劑盒操作說(shuō)明
間接法(檢測未知抗體)：
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對照)
3、加酶標抗體：于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀(guān)察結果：反應孔內顏色越深，陽(yáng)性程度越強，陰性反應為無(wú)色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
雙抗體夾心法:
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-1a0ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔)。
3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀(guān)察結果：反應孔內顏色越深，陽(yáng)性程度越強，陰性反應為無(wú)色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
