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實(shí)驗室科研工作離不開(kāi)抗體，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗體，那科研實(shí)驗室如何選擇合適的抗體呢？
一. 一抗選擇要點(diǎn):
1）.確定抗體的名字。注意中英文名字、它名、亞型等信息。
2）確定你的實(shí)驗類(lèi)型。Elisa，WB，IHC，ICC，還是FACS。一般抗體的說(shuō)明書(shū)都會(huì )列出該抗體經(jīng)驗證過(guò)適用于何種實(shí)驗的類(lèi)型，如果抗體說(shuō)明書(shū)沒(méi)有提及的應用類(lèi)型，并不意味著(zhù)該抗體不適用于此種分析應用類(lèi)型，而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種實(shí)驗驗證，請根據說(shuō)明書(shū)列出的已驗證的類(lèi)型來(lái)選擇適合你實(shí)驗的抗體。
3）.確定實(shí)驗樣本的種屬。Human，Mouse，還是Rat。一般抗體說(shuō)明書(shū)都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過(guò)適用于何種物種實(shí)驗，請根據說(shuō)明書(shū)列出已驗證的種屬來(lái)選擇適合你實(shí)驗的抗體。
4）.樣本蛋白的結構性質(zhì)。了解樣本蛋白的結構性質(zhì)有助于選擇最合適的抗體，待測樣本蛋白的結構域和樣本在提取和處理過(guò)程中是否會(huì )變性，蛋白空間構象的改變，會(huì )影響抗體的免疫親和反應。
5）.單多克隆抗體的選擇。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主，一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強，靈敏度高，但易出現非特異性染色(可以通過(guò)封閉等避免)。
二. 二抗選擇要點(diǎn):
1）.種屬來(lái)源。主要根據一抗種屬來(lái)源來(lái)決定購買(mǎi)二抗來(lái)源，如一抗是小鼠來(lái)源，那二抗就買(mǎi)抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
2）.標記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標記的二抗，以與后面的SP結合反應，而免疫熒光染色就需要購買(mǎi)不同熒光素標記的二抗，如羅丹明、FITC、Cy3等常用熒光素。
