小鼠牙乳頭細胞*培養基說(shuō)明 熱的夏季漸漸離我們而去，秋姑娘邁著(zhù)輕盈的腳步走進(jìn)我們的生活中。秋季是一個(gè)果實(shí)累累、瓜果飄香的季節，讓我們一起去看看秋天的果園。接下來(lái)介紹小鼠牙乳頭細胞*培養基說(shuō)明 細胞培養操作規程： 一．培養基及培養凍存條件準備： 1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。 2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。 3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。 二．細胞處理： 1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。 對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法： 方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 優(yōu)點(diǎn)： 1.研究的對象是活細胞 在實(shí)驗過(guò)程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長(cháng)時(shí)間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動(dòng)等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過(guò)細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類(lèi)型的細胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究?jì)热荼阌谟^(guān)察、檢測和記錄 采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 | 
