你遇到過(guò)ELISA試驗中酶標板失效的情況嗎
點(diǎn)擊次數:628 更新時(shí)間:2018-12-21
在進(jìn)行ELISA試驗時(shí),如果遇到酶標板失效的情況,就會(huì )影響到后期的實(shí)驗結果,那么在哪些情況下酶標板會(huì )失效呢,接下來(lái)小編為大家介紹一下。
1、通常商品化的酶標板要求密閉4℃保存,長(cháng)時(shí)間暴露或未密閉保存,就會(huì )導致酶標板失效,或者影響到終的測試結果。
2、第三板是否*按照前兩板加所有試劑,如果缺失其中某一步驟,結果也會(huì )無(wú)色。
一般來(lái)說(shuō),ELISA試劑盒的保質(zhì)期都在一年上下,如何保存得當,就不會(huì )出現問(wèn)題,但注意在使用中盡量不要反復凍融,試劑盒保存適當的環(huán)境溫度是4℃左右,同時(shí)建議大家ELISA試劑盒解凍后一次用完,已開(kāi)封或者使用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,ELISA檢測試劑盒開(kāi)封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。另外,如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話(huà),可能會(huì )影響,其直接的后果是對一些弱陽(yáng)性標本的檢測出現假陰性。
由此,小編建議大家:先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測定,以使試劑盒在ELISA檢測試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿(mǎn)足測定要求。
接下來(lái)小編再為大家介紹在進(jìn)行ELISA試驗時(shí),我們都應注意哪些事項:
1、從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2、各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3、濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
4、請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),做復孔,如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定計算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5、 嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。