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目的建立一種檢測奇異變形桿菌（Proteus mirabilis）快速且特異的PCR方法。方法針對編碼奇異變形桿菌脲酶調節子（ureR）的基因序列設計2條PCR引物,擴增片段長(cháng)度為225bp;通過(guò)對2株奇異變形桿菌和14株非奇異變形桿菌進(jìn)行PCR檢測、利用該PCR方法和傳統分離培養法同時(shí)對60份食物中毒送檢標本進(jìn)行檢測來(lái)評價(jià)其特異性;將奇異變形桿菌菌液做一系列10倍稀釋后進(jìn)行PCR檢測來(lái)對其進(jìn)行敏感性分析。結果2株奇異變形桿菌出現PCR擴增反應,擴增產(chǎn)物經(jīng)測序鑒定正確,14株非奇異變形桿菌沒(méi)有出現PCR擴增反應,且PCR檢測奇異變形桿菌的結果與傳統培養方法一致,PCR方法相比傳統培養方法更快速,在4h內即可完成擴增反應;PCR方法敏感性為30cfu/ml。結論建立了一種快速、準確檢測奇異變形桿菌的PCR方法,適合奇異變形桿菌日常監測和快速診斷的需要。
初的PCR技術(shù)相當不成熟，在當時(shí)是一種操作復雜、成本高昂、“中看不中用”的實(shí)驗室技術(shù)。1988年初，Keohanog通過(guò)對所使用的酶的改進(jìn)，提高了擴增的真實(shí)性。而后，Saiki等人又在黃石公園從生活在溫泉中的水生嗜熱桿菌內提取到一種耐熱的DNA聚合酶，使得PCR技術(shù)的擴增效率大大提高。也正是由于此酶的發(fā)現使得PCR技術(shù)得到了廣泛地應用，使該技術(shù)成為遺傳與分子生物學(xué) 分析的根本性基石。在以后的幾十年里，PCR方法被不斷改進(jìn)：它從一種定性的分析方法發(fā)展到定量測定；從原先只能擴增幾個(gè)kb的基因到目前已能擴增長(cháng)達幾十個(gè)kb的DNA片段。到目前為止，PCR技術(shù)已有十幾種之多，例如，將PCR與反轉錄酶結合，成為反轉錄PCR，將PCR與抗體等相結合就成為免疫PCR等。
