通用PCR試劑盒無(wú)需常規核酸提取即可進(jìn)行檢測
點(diǎn)擊次數：489 更新時(shí)間：2021-04-14
通用PCR試劑盒指的是在PCR進(jìn)行的同時(shí)，對其過(guò)程進(jìn)行監測的能力（即實(shí)時(shí)）。因此，數據可在PCR擴增過(guò)程中，而非PCR結束之后，進(jìn)行收集。這為基于PCR的DNA和RNA定量方法帶來(lái)了變革。
在實(shí)時(shí)熒光定量PCR中，反應以循環(huán)中檢測到目標擴增的時(shí)間點(diǎn)為特征，而非在一定循環(huán)數后目標分子素計的擴增量。目標核酸的起始拷貝數越高，則會(huì )越快觀(guān)察到熒光的顯著(zhù)增加。相反，終點(diǎn)法檢測（也稱(chēng)“讀板檢測”）測量的是PCR循環(huán)結束時(shí)素計的PCR產(chǎn)物量。
通用PCR試劑盒無(wú)需常規核酸提取，僅需對樣品進(jìn)行簡(jiǎn)單研磨、離心處理，即可開(kāi)始后續核酸檢測。在保證檢測結果準確可靠的前提下，簡(jiǎn)化了檢測步驟，將檢測時(shí)間縮短至不到1小時(shí)，成為適合于屠宰場(chǎng)、養殖場(chǎng)的技術(shù)。
通用PCR試劑盒“變性-退火-延伸”三個(gè)步驟的實(shí)現方法是：
1、變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，為下輪反應作準備；
2、退火：退火也叫復性，模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，在這個(gè)溫度下，模板DNA單鏈能夠與引物的互補序列配對結合；所謂引物，是一段已經(jīng)確定好的DNA的片段，通過(guò)引物找到模板DNA的相應位置，也就是確定了復制的起點(diǎn)；
3、延伸：DNA模板-引物結合物在72℃、DNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按照堿基互補配對原則和半保留復制原理，就能合成一條新的與模板DNA鏈互補的復制鏈。
希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本試劑盒。
