禽波氏桿菌PCR試劑盒的操作方法分享
點(diǎn)擊次數：361 更新時(shí)間：2023-06-06
PCR技術(shù)（聚合酶鏈式反應）是基于DNA可逆性復制過(guò)程的分子生物學(xué)技術(shù)，該技術(shù)以放大DNA作為檢測某類(lèi)特定微生物、基因或設置一類(lèi)基因突變的手段而廣泛使用。需要儀器設備和試劑盒等工具來(lái)進(jìn)行實(shí)驗操作?，F本文簡(jiǎn)單介紹如何操作
禽波氏桿菌PCR試劑盒。
步驟1：實(shí)驗準備
在進(jìn)行試驗前，請從-20℃保存禽波氏桿菌PCR試劑盒的內容物，冰凍在保險柜中長(cháng)達6個(gè)月或更久。嚴格損壞或超期的物品不要使用。將PCR換??nuclease-free水解凍，并遵循此后面指導的操作提示。
步驟2：混和PCR反應液
干燥PCR溶液A+B混合物重，加入dH_2O100μL（每個(gè)樣本）。從原始DNA樣本中提取1μL并將其添加到管中。每個(gè)標記使用完整盒子中的所有通量級別以確保溶液替代物可以容納一個(gè)確信區域。pipette上演沸騰30秒（龍頭混合澄清），離心10秒，并放入熱循環(huán)器中。
步驟3：樣品擴增
進(jìn)入熱循環(huán)過(guò)程，程序為（45秒95℃→30秒57℃→30秒72℃）×35次和10分鐘72℃。放置PCR產(chǎn)品在冰上。
步驟4：電泳檢測
從PCR反應管的每個(gè)標簽中移動(dòng)5μLPCR擴增產(chǎn)物，并將其滴到薄板或管中。然后使用1-2％瓊脂糖/TAE凝膠進(jìn)行電泳處理。用溴化乙錠染色，并通過(guò)UV燈檢查這些凝膠片。根據需要確定擴增產(chǎn)物的大小。
總之，在使用禽波氏桿菌PCR試劑盒時(shí)，需要了解其所采用的PCR技術(shù)并仔細閱讀說(shuō)明書(shū)，并在實(shí)驗室條件下非常謹慎地操作。
