一文為您介紹通用PCR試劑盒的檢測方法
點(diǎn)擊次數:722 更新時(shí)間:2021-03-22
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應分析)是以免疫學(xué)反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗技術(shù)。
通用PCR試劑盒需要時(shí)刻保溫,因為它屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時(shí)機,只需靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個(gè)逐步平衡的進(jìn)程,因而需經(jīng)分散才干到達反響的終點(diǎn)。
下面為您介紹通用PCR試劑盒的檢測方法:
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀(guān)察結果:反應孔內顏色越深,陽(yáng)性程度越強,陰性反應為無(wú)色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。