關(guān)于大鼠ELISA試劑盒的標本處理 你需要知道的幾點(diǎn)
點(diǎn)擊次數:614 更新時(shí)間:2019-01-10
大鼠ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體水平。用純化的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體,再與HRP標記的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體濃度。
關(guān)于
大鼠ELISA試劑盒的標本處理,您需要知道下列這幾點(diǎn):
1、本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。
2、實(shí)驗前應預測標本含量,如果標本濃度過(guò)高,應對標本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉吮痉显噭┖械臋z測范圍,計算時(shí)再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3、若樣本為細胞培養上清,因該類(lèi)樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測不出的情況。
4、建議使用新鮮樣本,保存時(shí)間過(guò)長(cháng)可能會(huì )存在蛋白降解或變性導致實(shí)驗結果偏差。
5、若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中,建議進(jìn)行預實(shí)驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
6、使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會(huì )由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導致ELISA實(shí)驗結果偏差。
7、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
大鼠elisa試劑盒所具有的高特異性?xún)?yōu)勢有哪些呢?
1. 特異性:指大鼠elisa試劑盒正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的才干(無(wú)假陽(yáng)性),取決于包被抗原(體)及符號抗原(體)的純度及特異性。
2. 安穩性:大鼠elisa試劑盒在規則條件下能儲存的時(shí)間,一般選用破壞性實(shí)驗行將試劑存放于37℃保存,定時(shí)測定其靈敏度,特異性和精密度等方針,直到其質(zhì)量方針開(kāi)端下降中止,一般認為37℃每安穩一天相當于4-10℃保存一個(gè)半月。
3. 簡(jiǎn)便性:
大鼠elisa試劑盒指在不影響試劑的前三項方針的前題下,實(shí)驗和測定過(guò)程越少越好,在定性實(shí)驗中成果判別簡(jiǎn)略明晰,定量實(shí)驗成果核算也應簡(jiǎn)略。 受方法學(xué)及技術(shù)條件的約束,在酶聯(lián)免疫吸附測定中有時(shí)不可避免的會(huì )出現必定的非特異性,咱們可以通過(guò)以上辦法把非特異性顯色降至至低限底,然后前進(jìn)檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實(shí)驗成果。